Gel Elektrophoresis |
Gel elektrophoresis adalah teknik
yang digunakan untuk memisahkan suatu fragmen DNA dengan cara mengaliri
listrik.Dapat juga dgunakan dalam melihat apakah proses PCR yang dilakukan
berhasil atau tidak.Dalam pemisahan fragmen DNA bergantung pada penggunaan gel
khusus yang bekerja seperti saringan molekular.Salah satu gel tersebut disebut
dengan gel agarosa.
Tahap Persiapan Gel Agarosa |
Penggunaan
aliran listrik didasarkan dengan pengertian bahwa suatu DNA memiliki muatan
negatif (seperti pada gambar 1).Sehingga
pada saat dialiri listrik maka molekul DNA akan bergerak ke arah kutub positif.
gambar 1 |
Tahap perlakuan kurang lebih
dengan dituangkannya fragmen DNA ke salah satu ujung gel,dan ketika arus
listrik dialirkan,maka fragmen-fragmen DNA akan bermigrasi menuju kutup positif
di ujung lainnya.Tetapi karena gel agarosa bekerja seperti saringan ,maka
fragmen yang berukuran besar akan sulit melewati pori-pori gel dibandingkan
dengan fragmen DNA yang berukuran lebih kecil.Sehingga setiap fragmen akan
dipisahkan berdasarkan ukuran.
Untuk melihat fragmen DNA
tersebut,digunakan pewarnaan khusus yang disebut etidium bromida,yang dapat
berikatan dengan molekul DNA.Meskipun tidak berwarna pada pencahayaan
biasa,perwarna tersebut akan berwarna jingga terang jika diletakan dibawah sinar
Ultraviolet (UV).
Hasil(melalui sinar UV) |
*Penggunaan voltase harus
dibatasi ,karena apabila terlalu besar akan membuat suasana menjadi panas yang
dapat menyebabkan melelehnya gel agarosa.
Untuk lebih jelasnya dapat anda lihat dalam animasi di Animasi gel elektophoresis
Sumber :
Brookes Martin(2005) dalam bukunya “Genetika”
Raharjo,Anto (2013) dalam kuliah “Instrumentasi Biologinya”
http://www.dnalc.org/resources/animations/gelelectrophoresis.html
http://snhs-plin.barry.edu/cell-biology-lab/cell_biology_lab1.htm
‘Ketikan sederhana’ dari saya.Bukan bermaksud menggurui melainkan berbagi sedikit ilmu dan insyaallah sebagai metode menghafal bagi diri saya pribadi.
Karena ‘Menghafal
dengan cara berbagi ilmu ,seperti mengukir diatas batu’.
Terimakasih ,Silahkan berkunjung pada ‘ketikan sederhana’ saya kembali.....